রাইবোনিউক্লিয়েজ ইনহিবিটর, RNase ইনহিবিটর 40U ul

পুনর্জাতকরণ মানব প্লেসেন্টা রাইবোনিউক্লিয়াজ ইনহিবিটর, 40U/μl

উৎস

এ. কোলায় পুনর্গঠিত ক্লোন বহনকারী শ্রেণী যা মানব প্লাসেন্টা থেকে রাইবোনিউক্লিয়েজ ইনহিবিটর জিন বহন করে।

আঁশ

40 U\/μl.

ইউনিট সংজ্ঞা

এক ইউনিট হল রিকম্বিন্যান্ট রাইবোনিউক্লিয়েজ ইনহিবিটর প্রয়োজন যা ৫ ন্যানোগ্রাম রাইবোনিউক্লিয়েজ এ এর ক্রিয়াকলাপকে ৫০% বাধা দেয়।

ক্রিয়াকলাপ রাইবোনিউক্লিয়েজ এ দ্বারা সাইটিডিন ২’৩’-সাইক্লিক মনোফসফেটের হাইড্রোলিসিসের বাধা দ্বারা পরিমাপ করা হয়।

স্টোরেজ বাফার

20mM HEPES-KOH(PH7.6), 50mM KCl, 8mM DTT, 50%(v\/v) glycerol

স্টোরেজ

-20°C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করুন

গুণত্ব নিয়ন্ত্রণ

এনডোনিউক্লিয়েজ অনুপস্থিতি
১μg ল্যামডা ডিএনএ কে ২০০ ইউনিট রাইবোনিউক্লিয়েজ ইনহিবিটর সঙ্গে ৩৭°সি উষ্ণতায় ১৬ ঘণ্টা প্রদর্শন করা হয়।
প্রদর্শনের পর, এথিডিয়াম ব্রোমাইড-আঁকা এগারোজ জেলে ল্যামডা ডিএনএ অক্ষত হিসাবে দেখা যায় যা দ্বারা দৃশ্যমান এন্ডোনিউক্লিয়েজের অভাব যাচাই করা হয়।

নিকেসের অভাব
১μg টাইপ আই সুপারকোইল্ড pBR322 কে ২০০ ইউনিট রাইবোনিউক্লিয়েজ ইনহিবিটর সঙ্গে ৩৭°সি উষ্ণতায় ৪ ঘণ্টা প্রদর্শন করা হয়।
প্রদর্শনের পর, সুপারকোইল্ড ডিএনএ এথিডিয়াম ব্রোমাইড-আঁকা এগারোজ জেলে দেখা যায় যা দ্বারা দৃশ্যমান নিকিং বা কাটিং এর অভাব যাচাই করা হয়।

এক্সোনিউক্লিয়েজের অভাব
১μg ল্যামডা ডিএনএ/হিন্ডIII মার্কার কে ২০০ ইউনিট রাইবোনিউক্লিয়েজ ইনহিবিটর সঙ্গে ৩৭°সি উষ্ণতায় ১৬ ঘণ্টা প্রদর্শন করা হয়।
প্রদর্শনের পর, ল্যামডা ডিএনএ/হিন্ডIII মার্কার ১% এগারোজ জেলে আলगোনা হয় এবং এথিডিয়াম ব্রোমাইড দ্বারা রং করা হয়। মার্কার অক্ষত ব্যান্ড হিসাবে থাকে ছড়ানো ছাপ ছাড়া।

আরএনেসে এবং ল্যাটেন্ট আরএনেসের অভাব
আরএনেস একটিভিটির উপস্থিতি যাচাই করতে, ১μg আরএনএ কে ২০০ ইউনিট রাইবোনিউক্লিয়েজ ইনহিবিটর সঙ্গে ৩৭°সি উষ্ণতায় ৪ ঘণ্টা প্রদর্শন করা হয়।
আংকুরণের পর, RNA-কে এথিডিয়াম ব্রোমাইড-চিহ্নিত এগারোজ জেলে একটি অক্ষত ব্যান্ড হিসাবে দেখা যায় যা দৃশ্যমান RNase-এর অনুপস্থিতি যাচাই করতে ব্যবহৃত হয়।
ল্যাটেন্ট RNase গতিশীলতা উপস্থিতির জন্য পরীক্ষা করার জন্য, 200 ইউনিট Ribonuclease Inhibitor-কে 70°C তাপমাত্রায় 15 মিনিট জন্য তাপ-অবস্থান্তরিত করা হয় এবং 1 মাইক্রোগ্রাম RNA-এর সাথে 37°C তাপমাত্রায় 4 ঘন্টা আংকুরণ করা হয়।
আংকুরণের পর, RNA-কে এথিডিয়াম ব্রোমাইড-চিহ্নিত এগারোজ জেলে একটি অক্ষত ব্যান্ড হিসাবে দেখা যায় যা দৃশ্যমান RNase-এর অনুপস্থিতি যাচাই করতে ব্যবহৃত হয়।

ভৌত শোধতা

SDS-পলিঅ্যাক্রিলামাইড জেলে Coomassie ব্লু রঙিন দ্বারা নির্ধারিত শোধতা ≥95%।

ব্যবহারের নোট

Ribonuclease Inhibitor একটি ব্যাপক pH রেঞ্জ (pH5.5-9) এ কার্যকর। মানক RT এবং in vitro ট্রান্সক্রিপশনে Ribonuclease Inhibitor-এর চূড়ান্ত আংশক প্রাঙ্গন 1u/ul হিসাবে ব্যবহৃত হয়।

অর্ডার